| 第1章 序論 |
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| 1.1 化学系の学生が「遺伝子操作」を学ぶ意義について |
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| 1.2 本書の構成 |
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| 1.3 DNAと遺伝子についての基礎知識 |
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| 第2章 ゲノムDNAの抽出・精製 |
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| 2.1 細胞の破砕 |
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| 2.2 DNAの単離 |
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| 2.3 DNAの精製(RNAの除去) |
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| 2.4 キットの利用 |
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| 第3章 プラスミドの性質と抽出法 |
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| 3.1 プラスミドとは |
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| 3.2 プラスミドベクター |
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| 3.3 プラスミドの形態 |
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| 3.4 プラスミドの抽出・精製 |
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| 第4章 大腸菌 |
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| 4.1 生きた試験管:大腸菌 |
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| 4.2 大腸菌の培養 |
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| 第5章 制限酵素 |
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| 5.1 制限酵素とは |
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| 5.2 制限酵素によるDNAの切断とアガロースゲル電気泳動 |
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| 5.3 プラスミドの構造とマルチクローニングサイト |
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| 第6章 DNAデータベースの活用 |
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| 6.1 DNA塩基配列情報検索 |
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| 6.2 遺伝子地図の作成 |
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| 6.3 クローニング |
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| 第7章 PCRによるDNA断片の増幅 |
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| 7.1 PCRの原理 |
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| 7.2 PCRで使用するDNAポリメラーゼとプライマーについて |
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| 7.3 プライマー設計 |
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| 7.4 反応条件 |
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| 第8章 大腸菌の形質転換 |
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| 8.1 プラスミドの導入 |
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| 8.2 形質転換株の培養 |
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| 8.3 形質転換マーカーとしての抗生物質耐性 |
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| 8.4 ブルー・ホワイトセレクション |
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| 第9章 遺伝子破壊 |
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| 9.1 遺伝子破壊の概要 |
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| 9.2 挿入失活 |
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| 9.3 遺伝子置換 |
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| 9.4 遺伝子欠損 |
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| 第10章 エレクトロポレーションによる遺伝子導入と相同組換え |
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| 10.1 エレクトロポレーション法とは |
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| 10.2 相同組換え |
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| 10.3 遺伝子破壊株の選抜 |
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| 10.4 致死遺伝子をマーカーとした変異株の選抜 |
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| 第11章 ハイブリダイゼーション |
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| 11.1 ハイブリダイゼーションとは |
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| 11.2 DNA試料作製とブロッティング |
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| 11.3 プローブの作成 |
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| 11.4 ハイブリダイゼーションとプローブの可視化 |
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| 11.5 コロニーハイブリダイゼーション |
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| 第12章 接合伝達による遺伝子導入 |
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| 12.1 接合伝達とは |
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| 12.2 接合伝達で用いるプラスミド |
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| 12.3 接合伝達による遺伝子導入操作の例 |
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| 12.4 変異株の選抜 |
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| 第13章 遺伝子導入と強制発現 |
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| 13.1 遺伝子導入実験の必要性 |
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| 13.2 プラスミド上の遺伝子の発現 |
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| 13.3 相同組換えによる遺伝子導入 |
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| 第14章 部位特異的変異(点変異)の導入 |
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| 第15章 遺伝子クローニングの現代的手段 |
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| 15.1 相同組換えを利用した遺伝子クローニング |
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| 15.2 人工遺伝子 |
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| 第16章 大腸菌による外来遺伝子の強制発現 |
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| 16.1 発現ベクター |
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| 16.2 発現タンパク質の回収 |
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| 第17章 DNAシークエンシング(塩基配列の決定) |
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| 17.1 ジデオキシ法 |
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| 17.2 サイクルシークエンス法 |
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| 17.3 ダイターミネーター・サイクルシークエンス法の操作 |
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| 17.4 外注による塩基配列決定 |
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| 第18章 変異株の保存 |
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| 第19章 遺伝子組換え実験の制限(カルタヘナ法) |
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